请问实验室的常用技术PCR,qPCR,rtPCR,western blot 分别是为了什么目的进行的实验?

2024-05-19 02:14

1. 请问实验室的常用技术PCR,qPCR,rtPCR,western blot 分别是为了什么目的进行的实验?

pcr 常用就是扩基因,提完rna后反转啊,那你扩来基因用做什么就需要你来看了。
菌落PCR,也是扩,放大数目,好验证。
qPCR是荧光染料,做定量,一般是看表达,就是基因的表达情况,基因层面
rtPCR是半定量,相对上面的定量来说没有完全量化,相当于是质化,也能看出问题
western 是做蛋白的

请问实验室的常用技术PCR,qPCR,rtPCR,western blot 分别是为了什么目的进行的实验?

2. 做完免疫组化检测某种蛋白后,还要加做WB和PCR吗

非必须做,能做当然是好的,可以提升文章的档次。单一形态学的结果略显单薄,不易发高分文章。    
WB还是挺关键的

3. 做实时PCR需要多少细胞

如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水

2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop

3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。

4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。

5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。

做实时PCR需要多少细胞

4. 胞水平进行WB和RT-PCR所需多少细胞,一般用多大的板子培养才能提足所需蛋白和RNA?

WB 10^6个一指标,RT-PCR 5*10^5个,北京德元国际科技有限公司可以做WB和RT-PCR,做的很多的,也可以提取蛋白

5. wb和pcr的数据不一致,怎么办

两个都重新做,不然两个数据都是不可信的,除非你能找到某个做错了
欢迎追问,求采纳。如果你要发文章的话,结果一定要一致可信

wb和pcr的数据不一致,怎么办

6. 求LPS对巨噬细胞都可以做哪些简单的实验,像刺激产生NO之类的,不要WB,PCR,ELISA之类的,只需细胞刺激的

没太简单的,

7. 某一基因在癌组织中过表达,需做细胞实验,是要该基因敲入还是敲除?

你当敲除那么容易啊。。。
如果他它是过表达,那肯定是促进生长或者抑制凋亡这类的,你先要在细胞水平做这些实验来验证它有这方面的作用,然后再将稳定过表达该基因的细胞系打老鼠成瘤,对比正常的该细胞系成瘤的大小,看是不是更大了,然后还要检测大量的临床样本看是不是真的过表达在癌组织中,还可以做原位杂交等实验比较正常组织和癌组织中该基因的表达量,反正基本上都是这个套路的

某一基因在癌组织中过表达,需做细胞实验,是要该基因敲入还是敲除?